1. (2017高三上·昌平期末) 对棉纤维基因GhRACK1的正常启动子P进行改造，获得了P1，P2，P3，P4缺失体．科研人员对正常启动子P及其4种缺失体（P1﹣P4）进行了实验研究．

1. （1）

   首先利用PCR技术扩增正常启动子P，方法如图1．
   

   
   

   

   ①不能直接根据片段Ⅰ扩增出正常启动子P，因为 ．

   ②利用酶处理使片段Ⅰ成为环状DNA．

   ③将环状DNA用酶处理，得到片段Ⅱ．欲扩增出正常启动子P，需选用的引物组合为 ．

3. （2）

   利用有关酶对正常启动子P进行切割，得到不同程度缺失体（P1﹣P4），图2表示正常启动子P缺失示意图．

   

   利用正常启动子P及其4种缺失体（P1﹣P4）分别构建了基因表达盒，如图3所示．

   

   再将5种基因表达盒分别转入相同质粒，构建相应的植物表达载体．然后将其导入农杆菌，最后导入烟草细胞中．用含有的培养基对烟草细胞进行筛选，分别获得了含有正常启动子P及其4种缺失体（P1﹣P4）的转基因烟草．将植物组织浸入适量溶液中，观察烟草细胞gus基因是否表达，实验结果如下表．

   	根	叶	花粉
   正常启动子P	幼根+根毛+	﹣	﹣
   P1	+	+	+
   P2	+	+	+
   P3	+	+	+
   P4	+	+	+

   有蓝色：+无蓝色：﹣

   如果烟草细胞中gus基因成功表达，则细胞呈现蓝色．实验结果表明 ．

   与P1﹣P4的实验结果相比，说明正常启动子P发挥不同功能的关键序列位于图2的 ． （填字母）