1. (2020·河南模拟) 蛋白质的提取和分离在分子生物学研究中具有重要意义。回答下列与蛋白质的提取和分离相关的问题：

1. （1） 血红蛋白提取和分离一般分为四步，即样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

   ①样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心，在洗涤红细胞时，离心速度过高和时间过长会使等一同沉淀，达不到分离的效果。洗涤干净的标志是。

   ②在的作用下，洗涤好的红细胞破裂，释放出血红蛋白。

   ③粗分离过程中，透析的目的是。

3. （2） 在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是。
5. （3） 在装填色谱柱时不得有气泡存在，因为。