1. (2020·泰州模拟) 蜘蛛丝中强度最好的牵引丝由主壶腹腺蛛丝蛋白（MaSp）组成。MaSp包括MaSp1、MaSp2两个组分。完整的MaSp1蛋白可分NT、RP、CT三个部分。研究者以大腹园蛛MaSp1的NT等为研究对象做了相关实验，以期了解大腹园蛛MaSp1的结构和成丝机理。实验流程图如图所示。请回答问题：

1. （1） 蜘蛛冻存之前通常要用灭菌蒸馏水清洗、饥饿等处理，其目的是；取冻存大腹园蛛的胸部组织捣碎，提取该蜘蛛的。
3. （2） 在仅知黑寡妇蜘蛛和摩鹿加云斑蛛MaSp1基因编码序列的情况下，研究者对比两者NT中的氨基酸序列，根据其中共有的一段含有7个氨基酸的保守序列，推测对应的DNA序列，据此设计出长度为个碱基的引物1。获取该引物常用方法。
5. （3） 利用PCR技术扩增目的基因时，经25～30轮扩增循环后，由于模板的增多，的数量会逐渐成为制约反应持续进行的主要限制性因素。
7. （4） 流程图中的空白处指构建，然后将该结构导入态的大肠杆菌。
9. （5） 分离、纯化NT蛋白时，为何不直接从培养液中提取，而是将表达该蛋白的工程菌破碎？