1. (2021·扬州模拟) 受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变。为探究温度对 PPO 活性的影响，实验小组进行如下实验：

1. （1） PPO 粗提液的提取在 （填“低温”或“高温”）条件下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取 20g 样品放入含 50mL 磷酸缓冲液（pH 值为 5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心、上清液即为 PPO 的粗提液，加缓冲液研磨的目的是。
3. （2） 不同温度下 PPO 活性的测定

   步骤顺序	试管 1	试管 2	试管 3	试管 4	试管 5	试管 6	试管 7	试管 8
   PPO 粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
   酚类底物		2mL		2mL		2mL		2mL
   反应	混合振荡		混合振荡		混合振荡		混合振荡
   温度预处理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
   保温时间	5min		5min		5min		5min
   记录结果	+		++++		++++		++

   （注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）

   ①实验步骤顺序有不妥之处，请改正。

   ②实验结果表明：15℃和 30℃温度条件，PPO 具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是。

   ③为进一步探究 PPO 最适温度，应在范围内设置温度梯度。

5. （3） 在温度 30℃的条件下，取等量提取液分别加到四支盛有等量过氧化氢溶液、pH 分别为 3、5、7、9 的试管中，结果发现每一支试管都产生气体。请回答：

   ①该实验的课题是：。

   ②各实验组均在 30℃下进行的原因是：a；b。