①卵母细胞的收集和体外培养:从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞,随机分成5组,分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中,在的培养箱中培养22﹣24h.
②卵母细胞成熟判断:在显微镜下观察卵母细胞,判断其是否成熟,统计结果如表1.
③体外受精:在受精溶液中进行体外受精后,用显微镜观察判断是否完成受精.
④早期胚胎培养:将受精卵移入胚胎培养液中培养44﹣48h后检查分裂情况,每隔48h更换一次培养液,第5﹣9天观察囊胚发育情况,统计结果如表2.
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
ALA浓度/μmol•L﹣1 | 卵母细胞数 | 核成熟卵子数 |
0 | 229 | 137 |
10 | 201 | 133 |
50 | 227 | 166 |
100 | 215 | 137 |
200 | 215 | 135 |
表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
ALA浓度/μmol•L﹣1 | 培养卵数 | 分裂数 | 囊胚数 |
0 | 309 | 171 | 75 |
10 | 325 | 182 | 82 |
50 | 292 | 185 | 97 |
100 | 310 | 188 | 84 |
200 | 231 | 145 | 68 |