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高中生物学
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综合题
1. 荧光蛋白(GFP)在紫外光下会发出绿色荧光,某科研团队将
GFP
基因插入质粒P中构建了重组质粒载体P
0
, 用于基因工程中基因表达载体(P
1
)的筛选和鉴定。部分过程如下图所示,下表为部分限制酶的识别序列及切割位点。请回答下列问题。
(1) 过程①中,用
Eco
RⅤ切割目的基因获得
末端。
(2) 过程②是利用
技术,多次循环扩增DNA片段;根据P
0
上的限制酶切割位点,需要在目的基因两端重设限制酶切割位点,则在扩增目的基因时,设计的引物5'端序列必须是
,以获得相应的黏性末端,便于P
1
的构建和筛选。
(3) 过程③中,P
0
需用限制酶
切割,才能与目的基因在
酶的作用下形成P
1
。
(4) 为了筛选出含有P
1
的菌落,需采用添加
的培养基进行培养,在紫外光激发下
(选填“发出”或“不发出”)绿色荧光的菌落,即为含有P
1
的菌落。
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