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高中生物学
/
1.
(2021高三上·河南月考)
为了提高牛粪中的纤维素降解效率,筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种,研究人员从牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离,获得了能高效分解纤维素的菌株,并测定其纤维素酶活力,再结合菌落形态等特征进行菌种鉴定。请回答下列问题:
(1) 取新鲜牛粪样品10g,加入装有90 mL无菌水的锥形瓶中,将锥形瓶固定在
上,在37℃下振荡培养2~3d,进行选择培养。选择培养的目的是
。
(2) 吸取锥形瓶中的培养液1 mL,加入盛有
mL无菌水的试管中混匀进行稀释,依次稀释到10
8
倍稀释度。取不超过
mL的10
5
、10
6
、10
7
倍稀释度的稀释液分别涂布于羧甲基纤维素钠培养基上,于37℃恒温培养箱中培养24h。
(3) 用接种环挑取颜色、形态不一的单菌落,使用
法接种到羧甲基纤维素钠培养基上继续培养,重复2~3次,直至得到较纯的菌株。再挑选单菌落于增菌培养基中培养24h,吸取2µL点种到羧甲基纤维素钠平板中培养48h后,将培养基用
溶液覆盖,10min后,倒去该溶液,再加入NaCl溶液,15 min后倒去NaCl溶液,测定透明圈的直径(H)和菌落直径(C),若
数值大,则说明菌体增殖速率快,若
比值大,则说明菌体分解纤维素的能力强。
(4) 对筛选出的菌株还要进行鉴定和酶活力测定,1个酶活力单位是指在温度为25℃,其他条件均为最适的情况下,
。
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