1. (2022高二下·衢州期末) 回答下列（一）、（二）小题：

（一）活性染料应用广泛，但其产生的废水含盐量高、有机质高、色度高，对环境污染严重。研究小组利用活性黄色染料筛选能降解活性染料的微生物菌种，以用于水体污染治理。

1. （1） 采样：在附近采集活性污泥，加入适量的，通入氧气，促进微生物的以备使用。
3. （2） 菌种筛选：取活性染料配置成500mg/L的培养基分装于5个锥形瓶，经后分别加入1mL的含菌种的污泥，置于中培养一段时间后，选择的锥形瓶中的微生物进一步分离提纯。
5. （3） 纯种分离：配置相应浓度的活性染料固体培养基后，若要操作简便，可利用法筛选得到纯的菌种。
7. （4） 菌种保存：分离得到的菌种可接种到培养基，置于4℃冰箱保存。
9. （5） （二）2018年非洲猪瘟病毒传至我国并对养猪业构成严重威胁，该病毒是一种双链DNA病毒，可编码多种蛋白质。非洲猪瘟病毒表面的主要结构蛋白p22蛋白，可以诱导猪产生抗体。工业上可利用转基因技术生产p22蛋白疫苗，并制备相应的单克隆抗体。请回答下列有关问题：
   p22蛋白疫苗的制备和鉴定。与p22蛋白基因及质粒有关的限制酶切位点如下图所示，已知不同种限制酶切割出的黏性末端不同。

          

   （LacZ基因能表达出β-半乳糖苷酶，使无色的半乳糖苷分解，进而使菌落呈现蓝色）

   ①根据p22蛋白基因的序列设计一对引物，通过技术扩增特定的DNA以获取目的基因；②构建重组DNA，利用酶（写出酶的名称）分别切割目的基因和质粒，以减少连接产物的种类并避免目的基因与质粒反向连接；③用重组质粒转化感受态细胞，并将受体细胞涂布在含氨苄青霉素的LB固体平板上，在37℃恒温培养箱培养12h，挑取的单菌落，将其转移至液体培养基扩大培养。一段时间后离心收集细胞，超声破碎后离心取上清液制备样品，利用的方法对p22蛋白进行鉴定。

11. （6） 抗p22蛋白的单克隆抗体制备及鉴定。p22蛋白可作为对小鼠进行多次注射后，分离出小鼠脾细胞，利用的仙台病毒促进该细胞与体外培养的骨髓瘤细胞融合；融合细胞经过多次筛选后得到的杂交瘤细胞具有的特点是；将选出的杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔，待小鼠腹部膨胀明显，采集，分离提取出单克隆抗体。