1. (2021高三上·浙江月考)     

1. （1） 营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基。回答下列问题：

   Ⅰ.培养基的配制与灭菌：按照培养基的成分计算、称量、溶化、、灭菌。

   Ⅱ.菌悬液制备：用从斜面培养基中取出菌种，接种到LB液体培养基中，在37℃摇床上振荡培养。

   Ⅲ.诱变处理：取3mL菌悬液加入到培养皿内，轻轻振荡，目的是。平放在灭菌的超净工作台上，打开皿盖，开启超净台中的用于诱变处理。

   Ⅳ.筛选营养缺陷型菌株：用移液器取诱变后的菌液适量，涂布接种在LB完全固体培养基37℃下培养24h。用无菌绒布“影印”完全培养基上的菌落接种到基本培养基上，37℃下培养24h。的菌落即为营养缺陷型菌株(如图所示)。采用影印法培养的优点是。

   

   Ⅴ.营养缺陷型菌株的鉴定：为鉴定某营养缺陷型菌的具体类型，将该菌种涂布接种于以下5组添加了不同类型氨基酸的基本培养基中，观察其生长状况。结果该菌株只能在A、C两组培养基中生长，则该菌株为营养缺陷型。

   组别	氨基酸组合
   A	组氨酸	苏氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
   B	精氨酸	苏氨酸	赖氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
   C	酪氨酸	谷氨酸	赖氨酸	色氨酸	丙氨酸
   D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	丝氨酸
   E	半胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	丝氨酸

3. （2） 亨廷顿舞蹈症（HD）是由于编码亨廷顿蛋白的基因（H基因）序列中的三个核苷酸（CAG）发生多次重复所致。研究表明，CAG重复的次数越多，患病的可能性及患病程度越大。我国科学家利用基因编辑（CRISPR/Cas9）技术成功培育出首个亨廷顿舞蹈病的基因“敲入”猪模型，操作过程如图。回答下列问题：

   

   Ⅵ.可利用基因编辑技术对猪的H基因改造为人的H基因。基因编辑技术常使用CRISPR/Cas9系统，需要对特定的DNA序列识别并切割。CRISPR/Cas9系统的功能类似于基因工程工具酶中的，可催化的断裂。

   Ⅶ.获得目的基因后，用法将目的基因导入猪的胚胎成纤维细胞。经核移植技术获得的重组细胞经过、、将胚胎移植至代孕母猪体内，产下F₀。此过程中选用胚胎成纤维细胞而不是体细胞的优点是。

   Ⅷ.将F₀与野生型杂交后筛选得到F₁ ， F₁再与野生型杂交后筛选得到F₂。由图可见，在上述繁殖过程中，CAG的重复次数会逐渐。在上述F₀、F₁、F₂中最适合作为亨廷顿舞蹈症模型猪的是F₂ ， 原因是。