1. (2023·浙江月考) 抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）在人体中主要由肝脏合成，是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子。研究者将人的抗凝血酶Ⅲ基因导入奶山羊细胞，获得乳汁中含有大量重组人的抗凝血酶Ⅲ的转基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白广泛存在于哺乳动物的乳汁中。回答下列问题：

1. （1） 抗凝血酶Ⅲ基因的获得与表达载体的构建：从人的中获得抗凝血酶Ⅲ基因的mRNA，逆转录成cDNA，并利用技术进行扩增。为顺利将抗凝血酶Ⅲ基因连接到奶山羊β-酪蛋白基因表达载体上，在设计引物时，应在引物前加入特地选用β-酪蛋白基因表达载体的原因是。与抗凝血酶III基因一起连接到基因表达载体上的还有新霉素抗性基因，该基因的作用是。
3. （2） 山羊成纤维细胞的培养、转化和筛选：取幼龄雌性动物的组织，经处理后获得成纤维细胞悬液，将带有ATⅢ转基因载体的脂质体（由磷脂和胆固醇组成的脂质双分子层所构成的封闭囊泡）与成纤维细胞共培养，获得含有目的基因的受体细胞，该转化方法的原理是。
5. （3） 转基因奶山羊的克隆：将经培养后的转基因细胞取核移入去核卵母细胞中，用处理后进行胚胎体外培养。在移植到的代孕母羊的子宫前，应将早期胚胎培养在的培养液中。代孕母羊怀孕、分娩获得转基因克隆奶山羊。
7. （4） 人的抗凝血酶Ⅲ的分子量大小及含量检测：收集转基因羊的羊奶和正常对照羊奶进行蛋白质凝胶电泳，使不同分子量的蛋白质在凝胶上分开，根据与比较，确定奶中抗凝血酶Ⅲ的分子量大小。利用与人的抗凝血酶Ⅲ进行特异性结合，根据荧光强度判断羊奶中抗凝血酶Ⅲ的含量。若最终获得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地行使其功能，可利用工程进行改造。