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  • 1. (2022高三上·浙江开学考) 回答下列(一)(二)小题:

    (一)某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌,并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定,以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方,其中溴甲酚绿遇酸变黄。

    牛肉膏

    蛋白胨

    酵母膏

    番茄汁

    葡萄糖

    吐温

    碳酸钙

    溴甲酚绿

    100mL

    1g

    1g

    1g

    20g

    1g

    0.05mL

    1.7g

    0.01g

    请回答下列问题:

    1. (1) 配制该培养基,除表中的成分外还需添加2g的;添加碳酸钙除了方便观察是否产酸,还可以产生CO2 , 以维持培养基的恒定。
    2. (2) 初步筛选:应用方法进行分离,挑选出的菌落作为初筛菌,再分别挑取其中形态大小各不相同的菌落进行菌种纯化;最终获得若干个不同的菌种用于后续测定。
    3. (3) 生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定:光电比色法可用于细菌细胞密度的测定,OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比,通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。在无菌条件下将不同菌种分别接种至MRS—NaNO2的培养基中,37℃厌氧培养24h。再将菌液,测定OD600值,OD600值相对较小的菌株生长能力。并通过测定发酵前后亚硝酸盐的含量,可以计算出

      (二)面对新冠疫情,最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测,原理为实时荧光定量PCR(RT—PCR)检测法,技术流程如下图所示,①②③表示相关步骤。请回答:

    4. (4) PCR技术与DNA体内复制过程相比,两者的复制方式都是。RT—PCR过程中,需先以RNA为模板合成cDNA,故装置中需添加酶。
    5. (5) 过程①中,RNA提取裂解液可同时灭活病毒,原因是。采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理,其目的是。步骤③需要的酶是,引物F和引物R是根据序列合成的。
    6. (6) 在进行新冠病毒核酸检测时,通常以病毒的ORFlab基因为检测的目标基因,是因为ORF1ab基因具有的特点。检测试剂中还加有“阳性对照”和“阴性对照”,阴性对照的主要作用是.

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