1. (2022高三上·唐山月考) 载体分为克隆载体（用于大量扩增外源DNA的载体）和表达载体（使目的基因既能扩增又能表达出相应蛋白的载体），大肠杆菌pUC118质粒是常用的克隆载体，具有氨苄青霉素抗性基因和lacZ基因。已知①lacZ基因表达产物在X-gal和IPTG存在下，可以使大肠杆菌菌落呈现蓝色；若lacZ基因被破坏，菌落呈现白色。②pUC118质粒中仅lacZ基因中具有限制酶A的识别位点。③胰岛素基因两侧分别具有限制酶A和限制酶B的识别位点。图1是pUCI18质粒经限制酶A切割后的DNA片段；图2~4是目的基因——人胰岛素基因经限制酶A和限制酶B的切割后的片段。

1. （1） 克隆载体pUC118质粒经改造后可作为表达载体，需要增加的表达元件（结构）有。
3. （2） 限制酶B识别的核苷酸序列和作用的化学键分别是和。
5. （3） 科研人员将经处理后的胰岛素基因与图1所示pUC18质粒混合，加入DNA连接酶进行连接反应。将得到的混合物导入大肠杆菌细胞前，大肠杆菌需用处理。
7. （4） 若筛选出目的菌株，则培养基中除营养物质外，还应添加。目的菌株在该培养基上的生长特点是。