1. (2023·朝阳模拟) 研究者改造与肠道共生的大肠杆菌，口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

1. （1） 部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV），如图1.OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

   

   研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞OMV的能力。

3. （2） 为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：

   组别	第0、3、8天口服工程菌	每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水	结果检测
   第1组	空载体	+	第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3.
   第2组	ClyA-Fc	+
   第3组	ClyA-OVA	+
   第4组
   第5组

   注：“+”、“-”代表是否饮用；

   口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

   

   ①第4、5组的操作是。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是。

   ②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入（填选项前字母）保温后漂洗，再加入（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组为最大值，则上述结论成立。

   A.带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物

   B.带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体

   C.第1-5组小鼠脾脏细胞

   ③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是。

5. （3） 该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：。