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  • 1. (2023高三上·湛江开学考) β-1,3葡聚糖酶可以水解许多病原真菌细胞壁外层的β-1,3葡聚糖和几丁质,降解真菌细胞壁,从而抑制真菌的生长与繁殖。研究人员在植物中克隆到β-1,3葡聚糖酶基因(BG2)并转入苹果主栽品种,以减少苹果真菌病害、实现无公害生产。据图回答下列问题:

    1. (1) BG2的克隆可利用PCR技术,需要一小段能与该基因碱基序列互补配对的作为引物,BG2在克隆前,需准备种引物。
    2. (2) 上图为利用PATC940(经农杆菌Ti质粒改造获得)构建BG2抗病质粒的过程。图中右下处的酶为DNA连接酶,人工设计的复合启动子的作用是驱动转录和提高(增强)转录活性,它位于目的基因(BG2)的(填“上游”或“下游”)。用Xba I 酶切、Spe I酶切、Not I酶切目的基因与PATC940的优点是构建基因表达载体时,可以防止以及防止目的基因与质粒反向连接。
    3. (3) 中国科学家独创的一种方法,将Bt基因导入棉花细胞,这种方法是,例如,可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入中、研究人员将转入BG2抗病质粒的农杆菌与苹果外植体共培养,进行遗传转化。目的基因BG2将随着T-DNA转移到被侵染的细胞而进入细胞,并随其整合到该细胞的染色体DNA上。
    4. (4) 在完成遗传转化后,培养基中至少要加入两种抗生素,请推测其作用分别是:一种用于杀死农杆菌,另一种用于

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