限制酶 | 识别序列 | 序列编号 | Y-M连接处测序后部分序列 | |
BamHⅠ | G↓GATCC | Q1 | 5′…AGATCTCCGATATT…3′ | |
EcoRV | GAT↓ATC | Q2 | 5′…AGATCTCCAAGCTT…3′ | |
HindⅢ | A↓AGCTT | Q3 | 5′…AAGCTTCCGGATCC…3′ | |
BgⅡ | A↓GATCT | Q4 | 5′…AAGCTTCCGATATC…3′ |
图3
分步实验目标 | 简易操作、结果、分析 |
PCR鉴定正向重组质粒Y-M(图2中融合片段M中有白色的箭头,代表方向) | ①选择图2引物; ②PCR目的产物约为bp。 |
确保M及连接处序列正确,Y-M的连接处上游含有HindⅢ+ EcoRV的识别序列,下游含有EcoRV+ BamHⅠ的识别序列 | ③质粒测序,图3中正确的是(选填序列编号) |
检测融合蛋白定位 | ④对照质粒Y-GFP(仅表达GFP)与实验质粒Y-M分别导入细胞,发现对照组整个细胞均有绿色荧光,而实验组荧光集中在纤毛基部,说明。 |