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  • 1. (2023高三上·和平月考) 表观遗传调节异常是肿瘤发生发展的重要因素之一,N6-甲基腺苷(m6A)是真核生物mRNA上最常见的一种修饰。研究发现,胃癌细胞中存在m6A去甲基化酶(ALKBH5)过表达和STC2(癌症相关基因)mRNA的m6A修饰水平降低的异常现象。科研人员利用基因工程技术实现ALKBH5基因沉默和STC2基因的过表达,以研究ALKBH5介导的m6A甲基化修饰对胃癌细胞迁移的影响。

    注:A、B、C、D为四种引物序列;BamHⅠ、HindⅢ、SacⅠ为限制酶

    1. (1) 已知STC2基因的α链为转录的模板链,据图1分析,利用PCR扩增目的基因时,需要在引物的5'端添加BamHI识别序列和强启动子序列,在引物的5'端添加SacI识别序列。
    2. (2) 为确保目的基因正确插入质粒,需要选择限制酶切割质粒。将重组质粒导入大肠杆菌体时,可利用潮霉素和卡那霉素筛选出导入重组质粒的大肠杆菌,试简要表述筛选思路:
    3. (3) 研究人员分别用不同方式处理胃癌细胞,并测得胃癌细胞迁移标志蛋白含量如下:

      根据结果推测ALKBH5基因影响胃癌迁移的机理是

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