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高中生物学
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综合题
1.
(2023高二下·东莞期中)
加端PCR是使扩增产物的末端加上一段DNA序列的PCR。加端PCR的引物被设计成除与模板配对的那一部分以外再加上若干碱基,以便能使扩增产物的末端加上额外的一段DNA。hIGF-1cDNA编码成熟蛋白的序列两端无起始密码子和终止密码子的对应位置,也没有合适的限制酶切割位点。实验人员为了在枯草杆菌中表达hIGF-1,应用加端PCR技术对hIGF-1cDNA进行改造,以期获得含有hIGF-1成熟蛋白79个氨基酸编码序列,并在两端分别带有PstⅠ和SalⅠ酶切位点的DNA片段。加端PCR技术示意图如下,回答下列问题:
(1) 进行加端PCR时应选用的引物是
。
(2) 在目的基因的两端添加限制酶切割位点的目的是
,将含有改造后的hIGF-1基因导入枯草杆菌的常用方法是用Ca
2+
处理枯草杆菌,其目的是
;原核生物作为基因工程的受体细胞的优点有
(答出3点)。
(3) 限制酶PstⅠ的识别序列及切割位点为-CTGCA↓G-,请根据该序列写出经PstⅠ切割后产生的黏性末端
。
(4) 在构建基因表达载体时,使用PstⅠ和SalⅠ酶两种限制酶切割hIGF-1基因和质粒,而不是只选择一种限制酶切割hIGF-1基因和质粒,这样做的优点是
(答出2点)。
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广东省东莞市重点中学2022-2023学年高二下册生物期中试卷