1. (2024·黑吉辽) 将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T﹣DNA转移）和不含有Vir基因、含有T﹣DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。

注：F1﹣F3，R1﹣R3表示引物；T﹣DNA﹣LB表示左边界；T﹣DNA﹣RB表示右边界；Ori表示复制原点；Kan^R表示卡那霉素抗性基因；HygB^R表示潮霉素B抗性基因。

1. （1） 从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是 。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是 。
3. （2） 本操作中获取目的基因的方法是 和 。
5. （3） 穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是 ，驱动目的基因转录；插入两个p35s启动子，其目的可能是 。
7. （4） 根据图中穿梭质粒上的Kan^R和HygB^R两个标记基因的位置，用 基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。
9. （5） 为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是 和 。
11. （6） 本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是 ____。

    A . 通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B . 将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C . 将1﹣1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D . 用1﹣1362合成基因序列和1363﹣1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白