1. (2018·江苏) 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

1. （1） 配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的，及时对培养基进行分装，并进行灭菌。
3. （2） 取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约（在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
5. （3） 挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有。

   a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

   b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

   c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量

   d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

7. （4） 步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上色细胞的个数应不少于，才能达到每毫升3×10⁹个活细胞的预期密度。