1. (2018·江苏) 为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1 656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：

1. （1） 利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的。
3. （2） 为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是。
5. （3） 进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中的设定与引物有关，的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）

   ①变性温度   ②退火温度   ③延伸温度   ④变性时间   ⑤退火时间   ⑥延伸时间

7. （4） 下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

   

   图中虚线框内mRNA片段包含个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有种。

9. （5） 获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：

   缓冲液	50 mmol/LNa2HPO4-KH2PO4				50 mmol/LTris-HCl				50 mmol/LGly-NaOH
   pH	6.0	6.5	7.0	7.5	7.5	8.0	8.5	9.0	9.0	9.5	10.0	10.5
   酶相对活性%	25.4	40.2	49.8	63.2	70.1	95.5	99.5	85.3	68.1	63.7	41.5	20.8

   根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为。