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菌株 |
抑菌圈直径/mm |
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未经酶处理 |
过氧化氢酶处理 |
胰蛋白酶处理 |
胃蛋白酶处理 |
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乳酸片球菌 C28 |
16.7 |
16.3 |
0 |
12.7 |
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格式乳杆菌 J57 |
16.3 |
16.3 |
0 |
0 |
| 2，4-D（mg/L）+ 6-BA（mg/L） | 诱导率（%） | 褐变率（%） |
| 1.0+0.5 | 0 | 0 |
| 2.0+0.5 | 100 | 62.5 |
| 3.0+0.5 | 100 | 100 |
| 1.0 +1.0 | 0 | 0 |
| 2.0+1.0 | 100 | 87.5 |
| 3.0+1.0 | 100 | 100 |
①制备工程农杆菌 ②构建植物表达载体
③获取人类凝血因子Ⅸ基因 ④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的检测
⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选 ⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性
① 由图 1 可知，用两种疫苗免疫小鼠，均可产生较高水平的抗体，说明两种疫苗均可激发小鼠对流感病毒的免疫应答。
② 由图 2 可知，两种疫苗都对小鼠有较好的作用。
① 设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补，另一部分序列与片段一部分序列互补。
② 通过 PCR 分别克隆A、C、P 片段。克隆 A 片段应选用的引物是。
③ 以 A、C、P 片段为进行延伸，将 A、P、C 片段拼接，再以引物 1、4 进行 PCR，扩增融合基因 Ve-FG。
① 电泳时应以为阳性对照。
② 成功导入 Ve-FG 基因的是。
③ 株系 1 可抗潮霉素，但电泳结果无阳性条带，原因可能是。
① 当样本中有目的基因时，引物和探针与目的基因退火，通过形成而特异性结合。
② 在 PCR 循环的阶段，TaqDNA 聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强
① 与指数增长期相比，线性增长期目的基因数量的增长率下降，原因有。
② Ct 值的含义：在 PCR 扩增过程中，每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此，当样本中初始模板越多时，Ct 值就。
③ 某新型冠状病毒核酸检测说明书标明，Ct≤37 判定为阳性，Ct>40 或无 Ct 值判定为阴性。图 2 所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为。
a．取样太早，样本中病毒量少，达不到实时荧光 PCR 检测阈值
b．样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解
c．病毒发生变异
胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来，就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿，为临床提供充足、质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。
人胰岛素由胰岛 β 细胞合成，核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽，进入内质网腔后，信号肽被切除，形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的 C 肽区域切除，A 链和 B 链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素（如图）。
最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似，但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5％～10％出现不同程度的过敏反应，抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛 β 细胞功能产生负面影响。
随着基因工程技术的发展，重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产，采用A、B链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代，即由大肠杆菌合成胰岛素原，然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同，但无法完全模拟生理胰岛素曲线，容易导致血糖波动，甚至导致低血糖发生。
上世纪90年代，科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构，研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物，包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如，将人胰岛素 B 链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸，可有效抑制胰岛素单体的聚合，皮下注射这种速效胰岛素类似物后，起效快（10-20分钟起效）、血药浓度峰值高、药效消失快，已经在临床上广泛应用。
a．直接从细胞内总 DNA 中分离目的基因
b．用化学方法直接人工合成目的基因
c．以 mRNA 为模板逆转录合成目的基因
d．利用 PCR 扩增人胰岛素原基因的编码序列
