Ⅰ.培养基的配制∶
PDA培养基∶土豆20%+葡萄糖20%+琼脂2%+水∶
G-PDA培养基∶ PDA培养基+0.04%愈创木酚+100μg/mL氨苄青霉素;
Ⅱ.菌种的分离∶
采集林下土样加入制成土壤悬液,利用法接种于G-PDA培养基平板上,将其于30℃恒温培养箱中培养,每隔24h观察等指标来衡量产漆酶的能力。
Ⅲ.粗酶液的制备∶
将分离出的菌株接种于液体产酶培养基中,30℃恒温振荡培养7d,培养液经离心后取作为粗酶液。漆酶的产量受发酵液初始pH、培养温度、 (至少两点)因素的影响.
Ⅳ.酶的应用∶
游离的漆酶的催化活性易受环境因素等影响,且难以,利用技术,可显著增强漆酶的利用率和对废水中BPA的去除效益。
Ⅰ.途径一∶
①获得目的基因∶若固氮基因片段是已知的,可用或者方法获得。
②形成重组DNA分子并导入受体细胞∶将固氮基因与载体DNA连接在-起,常选用作为该基因的载体使用,之后把形成的重组DNA分子导入植物细胞∶
③筛选与表达∶若受体细胞转入培养基中仍能继续生长发育,说明固氮基因已在受体细胞中表达;
④植物组织培养∶分离上述成功表达固氮基因的单个植物细胞,经过培养基中成分诱导,可发生类似受精卵经过卵裂、分化、和形态建成而发育成胚的过程,之后培养获得具有固氮能力试管苗.
Ⅱ.途径二∶将植物细胞经酶处理得到的原生质体与去壁后的固氮菌进行,再通过培养获得具有固氮能力的试管苗。
Ⅲ.上述两条途径获得的试管苗数量不够,需在初代培养后连续数代扩大繁殖,即过程。